Лабораторная диагностика инфекций: молекулярно-генетические и иммунологические исследования
Лекция № 12 сборника «Микробиология для медиков, 2025» Все видеолекции сборника: ▶️ Rutube: https://rutube.ru/plst/1175628 ▶️ VK Video: http://vkvideo.ru/playlist/-213203278_2 Принципы и методы лабораторной диагностики инфекций (часть 2). Современные молекулярно-генетические (ПЦР) и иммунологические (ИФА, ИХА) методы: аналитические характеристики и клиническая интерпретация. Ключевые темы: • Ключевые моменты предыдущей лекции: прямые vs. непрямые тесты, ограничения микроскопии и культурального исследования. • Молекулярно-генетические методы: принципы, возможности и ограничения. Применение в клинике. • Выделение ДНК/РНК из образца для молекулярно-генетического исследования. • Комплементарность нуклеотидов, термическая денатурация и ренатурация ДНК — основа методов. • Принцип и этапы ПЦР: температурная кривая, работа праймеров, ферменты реакции, стадия обратной транскрипции (ОТ-ПЦР). • Компоненты реакционной смеси ПЦР: подробно о праймерах и ДНК-зондах. Детекция ампликонов: каналы детекции и пороговый цикл (Ct). • Мультиплексные ПЦР тест-системы (панели). Секвенирование и ДНК-гибридизация (биочипы). • Прямые иммунологические методы: принципы, возможности и ограничения. • Сэндвич иммуноферментный анализ (ИФА) и иммунохроматографический анализ (ИХА). • Непрямые иммунологические методы: принципы, возможности и ограничения. • Трудности интерпретации результатов непрямых тестов: серонегативное окно и анамнестические антитела класса IgG. • Правильная интерпретация результатов непрямых антительных тестов: текущая vs. перенесенная инфекция. • Непрямой ИФА: выявление IgG, IgM и определение авидности антител. • Иммуноблот (вестернблот): подтверждение положительных результатов ИФА на ВИЧ. • Тесты на высвобождение гамма-интерферона (IGRA-тесты): выявление активированных T-клеток к специфическим антигенам. • Кожные тесты с антигенами: обнаружение гиперчувствительности замедленного типа. Тайм-коды: 00:00 Ключевые моменты части 1 04:07 Молекулярно-генетические методы 08:06 Применение в клинике 14:09 Выделение ДНК/РНК 16:35 Денатурация и ренатурация ДНК 18:15 Принцип и этапы ПЦР 28:11 Компоненты реакционной смеси 33:23 Детекция ампликонов и Ct 39:03 Мультиплексные ПЦР-панели 41:13 Секвенирование и биочипы 43:28 Прямые иммунологические методы 44:54 Сэндвич ИФА 47:27 Иммунохроматография (ИХА) 51:03 Непрямые иммунологические методы 54:35 Серонегативное окно и анамнез 56:44 Текущая vs. перенесенная инфекция 59:02 Непрямой ИФА и авидность 01:00:34 Иммуноблот 01:02:44 IGRA-тесты 01:05:22 Кожные тесты 01:07:11 Ключевые моменты Загрузить pdf-файл презентации можно по ссылке: https://disk.yandex.ru/d/b6wZ4EKdd678OQ #ПолимеразнаяЦепнаяРеакция #Секвенирование #Праймеры #ДНКЗонды #Иммуноблот #ИммуноферментныйАнализ #ИммунохроматографическийАнализ #IGRAТесты
Лекция № 12 сборника «Микробиология для медиков, 2025» Все видеолекции сборника: ▶️ Rutube: https://rutube.ru/plst/1175628 ▶️ VK Video: http://vkvideo.ru/playlist/-213203278_2 Принципы и методы лабораторной диагностики инфекций (часть 2). Современные молекулярно-генетические (ПЦР) и иммунологические (ИФА, ИХА) методы: аналитические характеристики и клиническая интерпретация. Ключевые темы: • Ключевые моменты предыдущей лекции: прямые vs. непрямые тесты, ограничения микроскопии и культурального исследования. • Молекулярно-генетические методы: принципы, возможности и ограничения. Применение в клинике. • Выделение ДНК/РНК из образца для молекулярно-генетического исследования. • Комплементарность нуклеотидов, термическая денатурация и ренатурация ДНК — основа методов. • Принцип и этапы ПЦР: температурная кривая, работа праймеров, ферменты реакции, стадия обратной транскрипции (ОТ-ПЦР). • Компоненты реакционной смеси ПЦР: подробно о праймерах и ДНК-зондах. Детекция ампликонов: каналы детекции и пороговый цикл (Ct). • Мультиплексные ПЦР тест-системы (панели). Секвенирование и ДНК-гибридизация (биочипы). • Прямые иммунологические методы: принципы, возможности и ограничения. • Сэндвич иммуноферментный анализ (ИФА) и иммунохроматографический анализ (ИХА). • Непрямые иммунологические методы: принципы, возможности и ограничения. • Трудности интерпретации результатов непрямых тестов: серонегативное окно и анамнестические антитела класса IgG. • Правильная интерпретация результатов непрямых антительных тестов: текущая vs. перенесенная инфекция. • Непрямой ИФА: выявление IgG, IgM и определение авидности антител. • Иммуноблот (вестернблот): подтверждение положительных результатов ИФА на ВИЧ. • Тесты на высвобождение гамма-интерферона (IGRA-тесты): выявление активированных T-клеток к специфическим антигенам. • Кожные тесты с антигенами: обнаружение гиперчувствительности замедленного типа. Тайм-коды: 00:00 Ключевые моменты части 1 04:07 Молекулярно-генетические методы 08:06 Применение в клинике 14:09 Выделение ДНК/РНК 16:35 Денатурация и ренатурация ДНК 18:15 Принцип и этапы ПЦР 28:11 Компоненты реакционной смеси 33:23 Детекция ампликонов и Ct 39:03 Мультиплексные ПЦР-панели 41:13 Секвенирование и биочипы 43:28 Прямые иммунологические методы 44:54 Сэндвич ИФА 47:27 Иммунохроматография (ИХА) 51:03 Непрямые иммунологические методы 54:35 Серонегативное окно и анамнез 56:44 Текущая vs. перенесенная инфекция 59:02 Непрямой ИФА и авидность 01:00:34 Иммуноблот 01:02:44 IGRA-тесты 01:05:22 Кожные тесты 01:07:11 Ключевые моменты Загрузить pdf-файл презентации можно по ссылке: https://disk.yandex.ru/d/b6wZ4EKdd678OQ #ПолимеразнаяЦепнаяРеакция #Секвенирование #Праймеры #ДНКЗонды #Иммуноблот #ИммуноферментныйАнализ #ИммунохроматографическийАнализ #IGRAТесты